· poileacrilamideFeumaidh gel a bhith air a dhèanamh le monomer acrylamide, stuth tòiseachaidh polymerization, catalyst, agus measgachadh salainn is bufair còmhla.
· acrylamideagus 's e BIS (N,N'- methylene double acrylamide) am maitrís gel ann an cruth monomer.
· pròiseas polymerization adhesive ammonium persulfate a thòiseachadh. Feumaidh foirmleachadh a’ ghliù fuasgladh 10% ammonium persulfate air ullachadh ann an uisge. Chomharraich a’ mhòr-chuid den fhiosrachadh gu robh feum air a chleachdadh gu gnìomhach. Ach, faodar am fuasgladh 10% a chuir aig 4℃ airson grunn sheachdainean gun chall gnìomhachd mòr. Lìon suas gu 10 ml agus tilg air falbh e nuair a dh’ fhailicheas air a’ ghliù cruinneachadh.
Molaidh: An ceudad deacrylamideAnn an sreathanachadh, chan eil glaodh agus glaodh pròtain mar an ceudna. Ma chleachdas tu fuasgladh acrylamide: BIS ro-dhèanta, dèan cinnteach gun faigh thu am botal ceart.
’S e catalaiche a th’ ann an TEMED (N, N, N’, N’- tetramethyl ethylenediamine), ann am botal donn, air a chur san fhrigeradair. Cuir ris dìreach mus dòirt thu an glaodh.
· Bu chòir glainne a thathar a’ cleachdadh ann an electrophoresis polyacrylamide a nighe ro agus às dèidh gach cleachdadh. Às dèidh electrophoresis, nigh le bruis bhog agus clò ann an uisge teth siabainneach, sruthlaich le uisge grùide agus leig leis tiormachadh.
Faodaidh taiseachd agus duslach adhbhrachadh le polymer falamh. Mus tèid electrophoresis a dhèanamh, glan am plàta glainne le inneal-glanaidh glainne agus sguab e le bruis bhog. nigh le uisge grùide agus tiormaich gu mionaideach le clò pàipeir. Bidh sruthladh le 70% ethanol mus tèid a sguabadh le pàipear a’ cuideachadh le glanadh agus a’ luathachadh tiormachadh. Cuir sampallan de acrylamide ris an dèidh a chèile: BIS, uisge, fuasgladh bufair, ammonium persulfate, TEMED. Crith gu math agus dòirt sa bhad.
Chan eil feum air polyacrylamide a dhì-ghasachadh mus tèid a phoilimearachadh. (B’ àbhaist acrylamide a chur ann am falamh gus builgeanan a thoirt air falbh oir tha ocsaidean a’ cur bacadh air poilimearachadh.)
Molaidhean sampall puing gluadh còmhnard.
· cuir pìos pàipeir dhubh anns a’ bhogsa aig a’ bhonn, cùl-raon dubh gus toll sampall a dhèanamh gus am faicear e nas soilleire.
· bufair làn tanca glaodh, dìreach os cionn a’ choloid.
· ma tha solas air an oir, cuir air na solais, leig leis an t-solas colloid deàrrsadh. Tarraing an sampall a-steach don phìobaid.
· a’ cleachdadh inneal pìobaireachd fèin-ghluasadach.
· ann an 10-200 mu 1 faodar puing gluasaid leaghaidh a chleachdadh anns a’ mhòr-chuid de na puingean air an sampall. Airson tuill sampall glè bheag (nas lugha na 10μ1), tha ceann pipette fada a thathas a’ cleachdadh airson glaodh sreath nas goireasaiche.
· pìobaireachd dìreach air a bogadh anns an sampall, a’ toirt anail a-steach don lionn a tha a’ gluasad gu slaodach. Dh’ fhaodadh gum bi an sampall a’ coimhead steigeach le glycerin, agus dh’ fhaodadh pumpadh luath builgeanan èadhair a tharraing a-steach do cheann a’ phìoba.
· Às dèidh ceann a’ phìoba a thoirt a-steach do na sampallan, gluaisidh e ceann an leaghan gu socair air oir na pìoba no suathaidh e pàipear gus ceann an leaghan a shùghadh a-mach às na boinneagan. Bi faiceallach gun a bhith a’ sùghadh an t-sampall.
Cuir an sampall a-steach don toll sampall
· inneal pìobaireachd gus beagan cuideam a chumail, gus am bi na sampallan a’ gluasad beagan thairis air ceann an leaghan.
· ceann a’ phìobaireachd air a chur a-steach don bhufair, beagan nas àirde na na tuill spot, a’ cumail cuideam adhartach. Faodar bàrr a’ phìobaireachd a chur a-steach do tholl beag.
· gu slaodach agus gu cunbhalach cuir na sampallan a-mach. Cuirear bàrr a’ phìoba os cionn toll puing an t-sampall, agus thèid an sampall fodha a-steach don toll. Leig leis an sampall dol fodha gus an toll sampall a lìonadh an àite a bhith ga phutadh a-steach.
· Cho luath ‘s a bhios an boinne mu dheireadh den sampall leis a’ cheann leaghaidh air, gluaisidh an leaghan chun an dàrna cas, togaidh e gluasad an leaghaidh mean air mhean, gluaisidh e a-mach às a’ bhufair
Ciamar a nì thu samplachadh glaodh dìreach?
· tuill sampall puing glaodh dìreach air an cruthachadh eadar dà phìos glainne. Ann an glaodh glè thana, chan urrainnear ceann a’ phìoba a chuir a-steach eadar dà phlàta glainne. Thoir an aire don glycerin! Cuir ceann a’ phìoba thairis air toll an t-sampall agus thèid an sampall fodha a-steach don toll.
· mus cuir thu puing an t-sampall, dèan cinnteach gun cuir thu puing dhìreach toll sampall gel polypropylene acyl air a shruthladh glan. nigh air falbh an acrylamide neo-phoileimearaichte agus an t-uisge a dh’ fhaodadh nochdadh aig bonn toll an t-sampall. Faodaidh an t-uisge an toll sampall a dhèanamh mòran nas lugha. Cleachd steallaire 25ml no 50ml agus snàthad 18-gauge. Dòirt a-steach am bufair electrophoresis agus sruthlaich an toll sampall gu faiceallach.
· faodaidh e bhith duilich toll an t-sampall fhaicinn, ach aig an aon àm, tha a’ chòrr furasta. Ma tha cus thuill ann, faodar bufair an t-sampall a dhearbhadh le gorm bromophenol.
Àm puist: 31 Màrt 2023