· polyacrylamidegel feumaidh le acrylamide monomer, polymerization stuth tòiseachaidh, catalyst, agus an làimh dheis salainn agus bufair measgachadh còmhla.
· acrylamideagus is e BIS (N, N '- acrylamide dùbailte methylene) am foirm monomer gel matrix.
· ammonium persulfate tòiseachadh adhesive polymerization phròiseas. Airson cruthachadh glaodh feumaidh fuasgladh 10% ammonium persulfate ullachadh ann an uisge. Sheall a’ mhòr-chuid den fhiosrachadh gu robh feum air cleachdadh gnìomhach. Ach, faodar am fuasgladh 10% a chuir aig 4 ℃ airson grunn sheachdainean gun call mòr de ghnìomhachd. Dèan suas ri 10 ml agus cuir às nuair nach eil an glaodh air a chruinneachadh.
Gliocas: An àireamh sa cheud deacrylamideann an òrdugh glaodh agus glaodh pròtain chan eil an aon rud. Ma chleachdas tu acrylamide premade: fuasgladh BIS, dèan cinnteach gum faigh thu am botal ceart.
· Tha TEMED (N, N, N ', N' - tetramethyl ethylenediamine) na inneal-catharra, ann am botal donn, air a chuir san fhrigeradair. Cuir dìreach mus dòrtadh glue.
· bu chòir glainne electrophoresis polyacrylamide ann an electrophoresis a nighe ro agus às deidh gach turas. Às deidh electrophoresis, nigh le bruis bog agus clò ann an uisge siabann teth, nigh le uisge grùide agus seas airson tiormachadh.
· faodaidh taiseachd agus duslach adhbhrachadh le polymer falamh. Mus tèid electrophoresis a dhèanamh, glan am plàta glainne le inneal-glanaidh glainne agus sguab e le bruis bog. Nigh le uisge grùide agus tiormaich gu mionaideach le sguab pàipear. Bidh a bhith a’ sruthadh le 70% ethanol mus sguab thu le pàipear a’ cuideachadh le bhith a’ glanadh agus a’ luathachadh tiormachadh. Cuir sampaill de acrylamide an dèidh a chèile: BIS, uisge, fuasgladh bufair, ammonium persulfate, TEMED. Crith gu math agus dòrtadh sa bhad.
Chan eil feum air polyacrylamide degass mus polymerization. (Bhiodh acrylamide air a chuir ann am falamh gus builgeanan a thoirt air falbh leis gu bheil ocsaidean a’ cur bacadh air polymerization.)
Molaidhean sampall puing gluasaid còmhnard.
· cuir pìos pàipear dubh sa bhogsa gu h-ìosal, cùl dubh gus sampall de tholl a dhèanamh gus faicinn nas soilleire.
· bufair làn tanca glaodh, dìreach os cionn a’ choloid.
· ma tha solas aig an oir, tionndaidh air na solais, leig le solas a bhith a’ deàrrsadh colloid. Tarraing an sampall a-steach don phìob.
· a 'cleachdadh inneal pìobaireachd fèin-ghluasadach.
· ann an 10-200 mu 1 faodar puing gluasad leaghaidh a chleachdadh anns a’ mhòr-chuid de na puingean air an sampall. Airson tuill sampaill glè bheag (nas lugha na 10μ1), tha an ceann pìoba fada a thathas a’ cleachdadh airson glaodh a chuir an òrdugh nas freagarraiche.
· pìobaireachd dìreach air a bhogadh san sampall, a’ toirt a-steach lionn a tha a’ gluasad gu slaodach. Faodaidh an sampall nochdadh steigeach le glycerin, agus faodaidh pumpadh luath builgeanan èadhair a tharraing a-steach don cheann pìoba.
· sampaill às deidh dhaibh ceann pìobaireachd a thoirt a-steach, gluaisidh iad ceann siùbhlach gu socair air oir na pìoba no sguabaidh pàipear ceann leaghaidh taobh a-muigh na boinneagan. Bi faiceallach gun a bhith a 'suathadh an sampall.
Cuir an sampall a-steach don toll sampall
· inneal pìobaireachd gus beagan cuideam a chumail, thoir air na sampallan gluasad beagan ceann lionn thar-shruth.
· bidh an ceann pìobaireachd a chaidh a chuir a-steach don bhufair, beagan nas àirde na na tuill spot, a’ cumail cuideam math. Faodar bàrr na pìoba a chuir a-steach do tholl beag.
· na sampallan a-mach gu slaodach agus gu cunbhalach. Tha tip na pìoba air a chuir os cionn an toll sampall puing, agus thèid an sampall a-steach don toll. Leig leis an sampall a dhol fodha gus an toll sampall a lìonadh an àite a bhith a’ putadh a-steach.
· aon uair ‘s gu bheil an tuiteam mu dheireadh den sampall le ceann leaghaidh, gluaisidh leaghan chun dàrna cas, tog an gluasad leaghaidh gu slaodach, gluais a-mach à bufair
Ciamar a nì thu samplachadh glaodh dìreach?
· tuill sampall puing glaodh dìreach air an cruthachadh eadar dà phìos glainne. Ann an glaodh gu math tana, chan urrainn eadhon ceann na pìoba a chuir a-steach eadar dà phlàta glainne. Thoir sùil air an glycerin! Cuir ceann na pìoba thairis air an toll sampall agus thèid an sampall a-steach don toll.
· sampall puing roimhe seo, bi cinnteach gun cuir thu puing dìreach toll sampall gel polypropylene acyl air a rinsing glan. Nigh air falbh an unpolymerized acrylamide agus an uisge a dh'fhaodadh nochdadh aig bonn an t-sampall toll. Faodaidh an t-uisge an toll sampall a dhèanamh gu math nas lugha. Cleachd steallaire 25ml no 50ml agus snàthad 18-tomhais. Thoir a-steach am bufair electrophoresis agus sruthadh gu faiceallach an toll sampall.
· faodaidh e a bhith duilich an toll sampall fhaicinn, ach aig an aon àm, tha an còrr furasta. Ma tha cus tuill ann, faodar am bufair sampall a dhearbhadh le gorm bromophenol.
Ùine puist: Mar-31-2023